La prueba del tiempo de reducción de azul metileno, según Agrosavia, la Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria, se ha establecido como un indicador de la concentración y actividad de microorganismos presentes en la leche cruda, lo que permite evaluar fácilmente su calidad higiénica y prever la carga microbiológica antes de su procesamiento o comercialización.
De acuerdo con las recomendaciones de Agrosavia, estos son los pasos y materiales necesarios:
Materiales requeridos
Pipetas de vidrio de 1 ml; pipetas de vidrio de 10 ml; pipetas Pasteur de 1 ml; tubos con tapa rosca de 10 ml; probeta graduada; papel filtro; balanza; leche; reactivo azul de metileno; etanol al 96% y agua destilada estéril.
Instrucciones:
- Disponer de todos los elementos necesarios en el área de laboratorio designada para el procesamiento de las muestras.
- Preparar la solución madre de azul de metileno: Pesar 0.5 gramos de reactivo azul de metileno y agregar 15 ml de etanol al 96%. Dejar reposar la solución durante 2 horas a temperatura ambiente, protegiéndola de la luz. Filtrar la solución con un papel filtro.
- Preparar la solución de trabajo: Tomar 5 ml de la solución madre y agregarlos a 195 ml de agua destilada estéril.
- Preparar controles positivos y negativos: Tomar aproximadamente 50 ml de leche pasteurizada o de buena calidad y llevarla a ebullición. Agregar 10 ml de leche hervida a un tubo de ensayo como control. Agregar 1 ml de la solución de trabajo de azul de metileno a cada muestra a probar.
- Mezclar las muestras por inmersión lenta y luego incubarlas en baño maría precalentado a 37°C, protegiéndolas de la luz directa.
- Monitorear cada 30 minutos las variaciones en el color de la leche utilizando como referencia el frasco de control.
- Registrar el tiempo en el cual la muestra cambia de color y se vuelve blanca.
- Finalizar la prueba cuando la leche pierda la coloración azul o si no hay cambios de color durante más de una hora.
Agrosavia recomienda realizar estas pruebas periódicamente, ya que la calidad de la leche y sus derivados dependen directamente de la materia prima proveniente de las zonas de producción y las condiciones de transporte, conservación y manipulación.
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